A major research objective of the ViVe group is to study plant virus transmission by aphid vectors, a very common propagation mode of plant virus disease. We thrive to uncover the molecular mechanisms of transmission, to understand how viruses modify plants to facilitate transmission and to identify resistance against transmission and infection.
As part of a new project, we have begun studying a virus that infects peas, pea enation mosaic virus (PEMV). PEMV is the most devastating aphid-borne virus affecting peas and other legumes. PEMV is very interesting from a scientific point of view, because it is a complex of two unrelated RNA viruses that form a symbiotic relationship. The enamovirus PEMV1 depends on the movement proteins of the umbravirus PEMV2 for systemic movement in the plant, and PEMV2 requires the capsid of PEMV1 for transmission.
In order to better study PEMV and characterize the role of its various proteins, we intend to construct an infectious clone of PEMV. To this end, viral RNAs will be extracted from infected plants, reverse-transcribed into cDNA and inserted into expression plasmids for agroinoculation. Once the clones have been obtained, they will be validated and characterized by agroinoculation in Nicotiana benthamiana and pea. For this, infection will be monitored by ELISA and RT-qPCR, PEMV localization in tissues and cells determined by immunofluorescence microscopy and transmission by aphids will also be tested. Time permitting, we also aim to construct GFP- and RFP-tagged PEMV1 and PEMV2, which will enable us to monitor the infection and distribution of PEMV1 and PEMV2 in living tissues.
This internship requires skills in molecular biology; knowledge of virology would be a plus. The internship will take place at INRAE Colmar (30 min by train from Strasbourg). Supervision will be provided by Martin Drucker, Akiko Sugio and Christiane Then. More info: https://svqv.colmar.hub.inrae.fr/personnel/drucker-martin
Un objectif de recherche majeur de l’équipe ViVe est étudier la transmission des virus de plantes par pucerons, un mode de transmission très répandu pour les viroses des plantes. Nous voulons comprendre les mécanismes de la transmission, comment les virus modifient la plante hôte afin de faciliter la transmission, mais également identifier des résistances contre la transmission et l’infection.
Dans le cadre d’un nouveau projet nous avons commencé à étudier un virus infectant le petit pois, le pea enation mosaic virus (PEMV). Le PEMV est le virus le plus dévaste pour les petits pois et autre légumineuses et transmis par pucerons. Il est intéressant d’un point de vue scientifique, parce qu’il est un complexe de deux virus à ARN qui forment une symbiose. Le PEMV1 est un enamovirus et le PEMV2 un umbravirus. Le PEMV1 dépend des protéines de mouvement du PEMV2 pour le mouvement systémique dans la plante et le PEMV2 requiert la capside du PEMV1 pour la transmission.
Afin de mieux étudier le PEMV et caractériser le rôle de ses différentes protéines, nous voulons construire dans le cadre de ce stage un clone infectieux du PEMV. Pour ceci, des ARN viraux seront extraits des plantes infectées, transformés par transcription reverse en ADNc et insérés dans des plasmides d’expression pour l’agroinoculation. Une fois les clones obtenus, ils seront validés et caractérisés par agroinoculation dans Nicotiana benthamiana et petit pois. Pour ceci, l’infection sera suivie par ELISA et RT-qPCR, la localisation du PEMV dans des tissus et cellules déterminée par microscopie en immunofluorescence et la transmission par pucerons sera aussi testée. Si le temps le permet, nous voulons également construire des PEMV1 et PEMV2 taggés par la GFP et la RFP, ce qui permettra de suivre l’infection et la distribution du PEMV1 et PEMV2 dans des tissus vivants.
Ce stage requiert des compétences en biologie moléculaire ; des connaissances en virologie seront un plus. Ce stage se déroulera à l’INRAE Colmar (30 min en train de Strasbourg). L’encadrement sera assuré par Martin Drucker, Akiko Sugio et Christiane Then. Plus d’infos : https://svqv.colmar.hub.inrae.fr/personnel/drucker-martin
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